聚丙烯塑料袋用高压、常压灭菌均可，而聚乙烯塑料袋只限于常压灭菌。塑料袋不能像瓶子那样卧放，必须竖立排放。此外，采用高压蒸气灭菌，特别要注意在排气时不应太急，让其慢慢降低压力，以防塑料袋膨胀爆破。灭菌后在搬运过程中，要小心不要刺破塑料袋。接种时，袋口接近酒精灯火焰，但要注意不能碰到火焰，以防塑料袋被烧破。
菌丝培养与瓶栽相同。但由于塑料袋培养料体积大，培养的时间较长，一般要30～35天才能发到底。用塑料绳扎口的，当菌丝发到袋的1／3体积时要松开扎口（但不能全部打开），让其通气，以利菌丝生长。在培养过程中，要防止老鼠咬破塑料袋，杂菌污染，影响成品率。
